顯微動態(tài)觀察細(xì)胞形態(tài)、運動和分裂過程并進(jìn)行分析，對于理解細(xì)胞生物學(xué)機制、疾病發(fā)生發(fā)展以及藥物研發(fā)等具有重要意義。以下是相關(guān)內(nèi)容介紹：

觀察方法與技術(shù)

熒光標(biāo)記技術(shù)：利用基因編碼技術(shù)將熒光蛋白與細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白結(jié)合，或選用能與細(xì)胞結(jié)構(gòu)或特定分子結(jié)合的熒光染料進(jìn)行染色，如用紅色熒光蛋白標(biāo)記染色質(zhì)凝聚因子 RCC1，用綠色熒光蛋白標(biāo)記微管蛋白，通過熒光信號來觀察細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)和分子的動態(tài)變化。

動態(tài)延時攝影：選用具有高速成像和精確控制功能的顯微鏡和攝像系統(tǒng)，設(shè)置合適的曝光時間、拍攝間隔等參數(shù)，對細(xì)胞進(jìn)行連續(xù)拍攝，再將圖像進(jìn)行疊加和處理，展現(xiàn)細(xì)胞分裂的連續(xù)動態(tài)過程。

高分辨率顯微成像技術(shù)：除了前面提到的 SIM、4Pi-SIM 等顯微鏡技術(shù)，還可以使用共聚焦激光掃描顯微鏡（CLSM），它通過逐點掃描和共聚焦原理，能夠獲得細(xì)胞的三維高分辨率圖像，減少背景熒光干擾，清晰觀察細(xì)胞形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)的動態(tài)變化。

細(xì)胞形態(tài)、運動和分裂過程的觀察與分析

細(xì)胞形態(tài)觀察：在細(xì)胞分裂過程中，細(xì)胞形態(tài)會發(fā)生一系列變化。例如，在有絲分裂前期，細(xì)胞會逐漸變圓，這一過程稱為有絲分裂細(xì)胞 rounding，同時細(xì)胞體積也可能發(fā)生變化。通過對細(xì)胞形態(tài)的定量分析，如計算細(xì)胞的球形度、表面積、體積等參數(shù)，可以了解細(xì)胞在不同生理狀態(tài)或外界因素影響下的形態(tài)改變。

細(xì)胞運動觀察：細(xì)胞的運動方式多樣，包括遷移、爬行、收縮等。在活細(xì)胞成像中，可以觀察到細(xì)胞在基質(zhì)上的遷移軌跡、速度和方向等。例如，免疫細(xì)胞在體內(nèi)的遷移對于免疫反應(yīng)的發(fā)生至關(guān)重要，通過顯微動態(tài)觀察可以研究免疫細(xì)胞的遷移機制以及藥物對其遷移的影響。

細(xì)胞分裂過程觀察與分析

前期：細(xì)胞核中染色質(zhì)開始凝聚形成染色體，染色體逐漸變短變粗，核仁漸漸解體消失，細(xì)胞兩極的 centrosomes 開始組裝紡錘體纖維。

中期：染色體排列到紡錘體的中央，著絲點都位于細(xì)胞中央的赤道面上，此時染色體形態(tài)最清晰，是觀察染色體形態(tài)和數(shù)目的最佳時期。

后期：染色體的著絲點分裂，姐妹染色單體分離，形成兩組子染色體，分別向細(xì)胞的兩極移動，紡錘體纖維逐漸縮短，牽引染色體移動。

末期：染色體到達(dá)兩極，核膜、核仁重新出現(xiàn)，細(xì)胞膜從細(xì)胞的中部開始內(nèi)陷，逐漸將細(xì)胞質(zhì)分裂成兩個子細(xì)胞，完成細(xì)胞分裂過程。

應(yīng)用案例

沖繩科學(xué)技術(shù)研究所的科學(xué)家們通過熒光標(biāo)記青鳉魚受精卵中的染色質(zhì)凝聚因子 RCC1 和微管蛋白，利用顯微動態(tài)觀察技術(shù)，發(fā)現(xiàn)了在早期胚胎的紡錘體中心部分存在一個特殊的微管密集區(qū)域，該區(qū)域比外圍的紡錘體更加穩(wěn)定，且 Ran-GTP 通路對胚胎分裂早期細(xì)胞的紡錘體組裝至關(guān)重要。