使用奧林巴斯 BX43 正置熒光顯微鏡觀察菌絲孢子的明場(chǎng)和熒光，具體步驟如下：

奧林巴斯 BX43明場(chǎng)觀察

奧林巴斯 BX43樣品準(zhǔn)備：將帶有菌絲孢子的樣本制成合適的玻片標(biāo)本。如果是固體培養(yǎng)基上的菌絲孢子，可用接種環(huán)挑取少量，均勻涂抹在載玻片上，加一滴蒸餾水或生理鹽水，蓋上蓋玻片；若是液體培養(yǎng)的菌絲孢子，可直接取一滴菌液于載玻片上，蓋上蓋玻片。

奧林巴斯 BX43儀器準(zhǔn)備：連接并打開顯微鏡電源，開啟光源，通過(guò)調(diào)節(jié)旋鈕將光強(qiáng)調(diào)至合適亮度。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)盤，選擇低倍物鏡，如 4X 或 10X 物鏡。

奧林巴斯 BX43放置樣品：將制備好的玻片標(biāo)本平穩(wěn)放置在載物臺(tái)上，用載物臺(tái)夾具固定好，通過(guò)載物臺(tái)的移動(dòng)旋鈕將樣品移動(dòng)到視野中心。

奧林巴斯 BX43對(duì)焦：轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)焦旋鈕，使載物臺(tái)上升或下降，直到在目鏡中能看到模糊的菌絲孢子圖像，再使用微調(diào)焦旋鈕將圖像調(diào)節(jié)至清晰。

奧林巴斯 BX43觀察與記錄：從目鏡中觀察菌絲孢子的形態(tài)、大小、顏色、分布等特征，移動(dòng)載物臺(tái)，觀察不同視野下的菌絲孢子情況。若需要記錄圖像，可將顯微鏡與攝像頭系統(tǒng)連接，打開圖像采集軟件，設(shè)置好采集參數(shù)，如分辨率、曝光時(shí)間等，進(jìn)行圖像拍攝。

奧林巴斯 BX43熒光觀察

奧林巴斯 BX43樣品準(zhǔn)備：如果菌絲孢子本身沒有熒光特性，需先用合適的熒光染料進(jìn)行染色。例如可使用熒光增白劑等對(duì)菌絲孢子細(xì)胞壁進(jìn)行染色，或用特異性的熒光抗體標(biāo)記菌絲孢子中的特定抗原。染色完成后，按照明場(chǎng)觀察的樣品制片方法，將染色后的菌絲孢子制成玻片標(biāo)本。

奧林巴斯 BX43儀器準(zhǔn)備：確認(rèn)熒光模塊已正確安裝，根據(jù)所使用的熒光染料的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)，選擇合適的熒光濾光片組。打開熒光光源，一般有汞燈或 LED 熒光光源等，讓光源預(yù)熱穩(wěn)定，調(diào)節(jié)熒光光源的強(qiáng)度旋鈕至合適強(qiáng)度。

奧林巴斯 BX43放置樣品并初步對(duì)焦：將制備好的熒光染色樣品玻片放置在載物臺(tái)上固定好，先在明場(chǎng)下找到菌絲孢子所在區(qū)域并對(duì)焦清晰，然后關(guān)閉明場(chǎng)光源或使用擋光板擋住明場(chǎng)光路。

奧林巴斯 BX43熒光對(duì)焦與觀察：在熒光模式下，可能需要微調(diào)焦旋鈕來(lái)進(jìn)一步清晰聚焦熒光圖像。觀察菌絲孢子發(fā)出的熒光顏色、強(qiáng)度、分布等特征，注意避免長(zhǎng)時(shí)間觀察導(dǎo)致熒光淬滅。移動(dòng)載物臺(tái)，觀察不同區(qū)域的菌絲孢子熒光情況，分析熒光信號(hào)所反映的菌絲孢子的結(jié)構(gòu)、成分等信息。

奧林巴斯 BX43圖像記錄與分析：使用顯微鏡配套的成像系統(tǒng)或外接相機(jī)進(jìn)行熒光圖像拍攝，合理設(shè)置曝光時(shí)間、增益等參數(shù)，確保拍攝到清晰、準(zhǔn)確的熒光圖像。將拍攝的圖像導(dǎo)入圖像處理軟件中，進(jìn)行測(cè)量、分析，如計(jì)算熒光強(qiáng)度、熒光面積等，根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?duì)圖像結(jié)果進(jìn)行解讀和分析。